iPS細胞完全培養基

貨號：H-A001

規格：500mL

儲存條件：基礎培養基2 ~ 8℃，添加劑-80 ~ -20℃；混勻后2 ~ 8℃，2周內使用完畢。

產品簡介：

iPS細胞培養基是上海慧穎生物科技有限公司引進開發出的一種適用于無飼養層培養、化學成分明確、并且不含動物源蛋白的人多潛能干細胞（hESC/hiPSC）完全培養基。iPS細胞培養基是在James Thomson實驗室開發的Essential 8培養基的基礎上，由上海慧穎生物科技有限公司改良研發出的最新型多潛能干細胞完全培養基。hESC/hiPSC在iPS細胞培養基中可以快速增殖，而分化的細胞則無法在該培養基中生長，從而選擇性擴增并獲得高純度多潛能干細胞。

產品內容：

試劑準備：

iPS細胞完全培養基：將iPS細胞添加劑加入iPS細胞基礎培養基中形成iPS細胞完全培養基（推薦每2mL添加劑與50mL基礎培養基混合）。

iPS細胞完全培養基可在2-8℃穩定儲存2-3周。

疑難解答：

?是否還需要往iPS細胞完全培養基中補充或添加成分？

不需要。iPS細胞培養基中各個成分的質量和濃度都經過了最優化實驗，完全支持人ESC/iPSC的長期培養，您無需再自行添加。

?培養基中有沉淀狀物質是否是質量問題？

添加劑在解凍過程中，若有少量沉淀析出，屬于正常現象，不影響使用，請充分混勻后與基礎培養基混合。但添加劑不能在37℃解凍，否則會析出大量沉淀，影響培養基的效價。如果培養基中出現大量沉淀，請不要使用。

?是否能在37 ℃反復水浴iPS細胞完全培養基？

不能。頻繁地在4℃和37℃之間轉換會導致iPS細胞完全培養基中含有的因子失活，iPS細胞完全培養基在使用前平衡至室溫即可。

? iPS細胞在傳代后不貼壁怎么解決？

造成iPS傳代后不貼壁的最可能的原因：

① 細胞消化時間不合適；②消化后吹打次數不合適，使得完成傳代后細胞集落過大或過小。

? iPS分化怎么處理？

①細胞在剛復蘇或傳代時，小的細胞團不呈現標準的克隆形態，培養幾天或傳代后可恢復。②如果iPS分化的表現為干細胞克隆形態良好，克隆周邊出現散在的分化細胞，可通過高比例傳代（≥1:10），使得分化細胞的密度減少，低密度的分化細胞可被iPS培養體系篩選去除，如未完全去除，可用細胞刮或巴斯德管刮除。

③如果iPS分化的表現為克隆內部松散，邊緣不平滑，在分化比例小或分化不嚴重的情況下，可通過連續傳代2 ~ 3次恢復，如果分化嚴重，建議棄除。

? 細胞復蘇率低是什么原因？

細胞復蘇需使用iPS細胞復蘇培養基，可大大提高細胞的復蘇效率。復蘇過程中，轉移細胞、吹打混勻和重懸細胞時，吹打力度要輕柔，并盡量減少吹打次數，細胞接種后，即刻在顯微鏡下觀察細胞團塊的大小，4 ~ 10個細胞的團塊為最佳。如果吹打力度過大或次數過多，

導致細胞分散成單細胞，細胞復蘇率將偏低。