懸浮細(xì)胞收集的處理方法

注意：瓶中運輸培養(yǎng)基不能繼續(xù)使用，請換用按照說明書培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。培養(yǎng) 懸浮細(xì)胞建議用未經(jīng)TC處理的培養(yǎng)瓶。

STEP1:靜置4h后，請將瓶內(nèi)所有細(xì)胞收集至6個15ml 的離心管110g(1000rpm)離心3min, 將所有離心 后的細(xì)胞沉淀收集到一個T25 培養(yǎng)瓶內(nèi)，平放10分鐘，鏡下觀察細(xì)胞密度，拍照記錄后放入培養(yǎng)箱中繼 續(xù)培養(yǎng)，第二天密度達(dá)到80%即可傳代；

STEP2:懸浮細(xì)胞半換液處理：將培養(yǎng)瓶豎立在培養(yǎng)箱中靜置1小時左右，輕輕吸掉瓶內(nèi)3ml 培養(yǎng) 基，然后補給3ml 的細(xì)胞完全培養(yǎng)基，傳代的時候可以直接補給5ml 細(xì)胞完全培養(yǎng)基，分兩個培養(yǎng)瓶培養(yǎng)，一般這樣傳代3次左右可以離心傳代一次，去掉死細(xì)胞；

STEP3:懸浮細(xì)胞傳代方法:觀察細(xì)胞無碎片無死細(xì)胞的情況下，建議直接加入新鮮的細(xì)胞完全培養(yǎng)基直 接分瓶即可。

售后服務(wù)：

1.常溫細(xì)胞為 T25 培養(yǎng)瓶發(fā)貨，若收到細(xì)胞后狀態(tài)差，活率低，請當(dāng)天拍照記錄，發(fā)給技術(shù)支持或 者銷售人員；根據(jù)情況，不能調(diào)整或者調(diào)整培養(yǎng)一周后，狀態(tài)沒好轉(zhuǎn)的，可給予重發(fā)細(xì)胞。

2. 收到細(xì)胞24小時內(nèi)出現(xiàn)細(xì)菌、真菌、霉菌污染給于免費重發(fā)。4 8 小 時檢測支原體陽性無條件重發(fā) (吸取上清至冰箱保存48小時之后檢測的不算準(zhǔn)確結(jié)果)收到細(xì)胞有污染現(xiàn)象，請于收貨當(dāng)天 及時拍照記錄，提供清晰的照片(照片為原培養(yǎng)瓶未拆封外觀照和顯微鏡下細(xì)胞狀態(tài)的照片);在培養(yǎng) 瓶未開封的情況下，可給予重發(fā)細(xì)胞。

3.若收到細(xì)胞有漏液現(xiàn)象，請于收貨當(dāng)天及時拍照記錄(照片為原培養(yǎng)瓶未拆封外觀照和顯微鏡下細(xì) 胞狀態(tài)的照片);請保留原瓶培養(yǎng)基，并將原瓶培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到一個無菌的容器內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)3天內(nèi)出現(xiàn) 細(xì)胞污染現(xiàn)象，可給予重發(fā)細(xì)胞。

4. 收到常溫細(xì)胞時狀態(tài)無異常，用戶自身操作導(dǎo)致細(xì)胞污染、細(xì)胞狀態(tài)不佳、細(xì)胞凍存后復(fù)蘇不活 的，不予免費重發(fā)。

5. 細(xì)胞培養(yǎng)時，使用其他非細(xì)胞培養(yǎng)體系外源試劑處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予免費重發(fā)。

6.非細(xì)胞出廠質(zhì)量問題，客戶自身操作導(dǎo)致的細(xì)胞死亡，自收貨日起一個月內(nèi)可以申請低價二次購 買折扣(原代細(xì)胞除外)。

7.細(xì)胞相關(guān)實驗受多種因素影響，非細(xì)胞鑒定問題，實驗數(shù)據(jù)不理想的，不予退/換細(xì)胞。

常溫細(xì)胞收貨注意事項：

觀察是否有異常現(xiàn)象

收到貨后如發(fā)現(xiàn)有任何異常現(xiàn)象，如污染，漏液，細(xì)胞漂浮等，請拍照記錄，并及時聯(lián)系我們銷售 人員或者技術(shù)支持。

將培養(yǎng)瓶放置培養(yǎng)箱中靜止

用75%酒精擦拭瓶身，封口膜可以不用撕去，將 T25 瓶置于培養(yǎng) 箱中靜置2~4h 后進(jìn)行操作，(注意：懸浮細(xì)胞請將培養(yǎng)瓶豎立在 培養(yǎng)箱中靜置),在此期間，請查看說明書以確定細(xì)胞屬性。

觀察細(xì)胞密度是否超過80%

觀察細(xì)胞密度，若超過80%則可正常傳代處理(有些原代細(xì)胞不 可傳代，請仔細(xì)查閱細(xì)胞說明書并根據(jù)實際情況決定),首次傳代推 薦比例1:2。

注意：傳代比例指的是同等大小容器的前提下，如需更換培養(yǎng)容器，則需換算培 養(yǎng)容器貼壁面積，例如：一個T25 瓶的貼壁面積相當(dāng)于1個6cm 的皿，1個10cm的皿的貼壁面積相當(dāng)于3個T25瓶，1個T75瓶的貼壁面積相當(dāng)于3個T25 瓶。

觀察細(xì)胞密度，若細(xì)胞密度不到80%,建議吸出運輸培養(yǎng)基，加入5ml 細(xì)胞完全培養(yǎng)基，培養(yǎng) 到可傳代密度。