0.25%胰蛋白酶-EDTA 溶液說明書
產(chǎn)品名稱：0.25%胰酶溶液
貨號：H0518
規(guī)格：100ML
一、產(chǎn)品組成與性質(zhì)
主要成分：胰蛋白酶（2.5 g/L）、EDTA-2Na（0.2 g/L）、酚紅指示劑，溶劑為 PBS 緩沖液。
理化性質(zhì)：紅色澄清液體，pH 7.2-8.0，無菌處理，含低溫保存環(huán)境下 12 個月有效期。
二、操作步驟（以貼壁細(xì)胞為例）
預(yù)處理
棄去原培養(yǎng)基，用預(yù)溫的 DPBS 或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞 1 次，去除殘留血清。
消化
加入適量胰酶溶液（如 75 cm2培養(yǎng)瓶加 5 ml），確保覆蓋細(xì)胞層，37℃孵育 1-3 分鐘。
顯微鏡觀察細(xì)胞收縮或邊緣卷起時終止消化（輕拍容器輔助脫落）。
中和與收集
加入含血清的完全培養(yǎng)基（體積≥胰酶量 2 倍）終止反應(yīng)，吹打混勻后轉(zhuǎn)移至離心管。
1000 rpm 離心 5-10 分鐘，棄上清后重懸細(xì)胞并計數(shù)。
三、注意事項(xiàng)
消化控制
消化時間因細(xì)胞類型而異，敏感細(xì)胞（如原代細(xì)胞）需縮短時間或降低濃度至 0.05%。
無菌操作
避免反復(fù)凍融，分裝后-20℃保存；開封后建議 4℃短期存放并盡快使用。
溶液狀態(tài)
酚紅變色（如偏紫色）提示 pH 異常，需更換新鮮消化液。
特殊應(yīng)用
含 EDTA 的溶液可能影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)（如流式檢測），可換用不含 EDTA 的胰酶。
四、儲存條件
未開封：-20℃避光保存，有效期 12 個月。
開封后：4℃保存不超過 1 個月，避免污染。
五、適用場景（注意事項(xiàng)：僅限科研用途，不可用于臨床）
貼壁細(xì)胞傳代（如腫瘤細(xì)胞、干細(xì)胞）。
單細(xì)胞懸液制備（用于流式細(xì)胞術(shù)、細(xì)胞分選）。
初生組織塊解離。
特別說明：
本產(chǎn)品含磷酸鹽體系，在低溫冷凍保存后溶液呈黃色。這是由于溫度導(dǎo)致溶液pH值發(fā)生變化，在正常解凍復(fù)溫后即恢復(fù)為紅色，不影響產(chǎn)品使用性能。可能會因某些原因（例如采用干冰運(yùn)輸）導(dǎo)致溶液pH略微下降，從而使溶液顏色由紅色變成淺黃色。該種淺黃色的溶液依然可以使用，或者也可采用無菌的2M NaOH溶液對pH進(jìn)行微調(diào)后使用。
