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HCT116/L細(xì)胞,人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞

產(chǎn)品貨號(hào)ALWS-0054(54)
產(chǎn)品規(guī)格T25
目錄價(jià)格 4000.00
产品信息
特點(diǎn) 完全培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+10000ng/ml L 血清我們推薦用: GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。 培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
特性 貼壁生長(zhǎng),上皮細(xì)胞
優(yōu)勢(shì) 已通過(guò)STR鑒定,正確細(xì)胞,放心購(gòu)買
產(chǎn)品詳情

收到細(xì)胞后,在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

(一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量完全培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加完全培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒(méi)有特別說(shuō)明,收到細(xì)胞后的第一次傳代一般是一傳二。

注:1、觀察細(xì)胞最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下。

2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3、有些細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。

4、收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)及時(shí)與我們聯(lián)系

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